脂质组学产品介绍

脂质是自然界中存在的一大类极易溶解于有机溶剂、在化学成分及结构上非均一的化合物,主要包括脂肪酸及其天然发生的衍生物,以及与其生物合成和功能相关的化合物。脂质组学是代谢组学的一个分支,一般认为脂质组学是研究生物体内所有脂质分子的特性,以及它们在蛋白表达和基因调控过程中作用的学科。目前已建立的脂质组学分析方法较多,较先进的软电离质谱(ESI-MS)能对脂质分子进行定性和定量分析,已成为脂质组学强有力的工具。

脂质组学产品介绍

一、脂质组学:

     脂质组学的研究于人类的健康密切相关。目前脂质组学已经成为代谢组学的重要分支之一,而且研究热度越来越高,尤其在疾病研究领域尤为突出,如代谢紊乱,心血管代谢综合征、肿瘤、Alzheimer's disease等。此外脂质还参与生长发育、神经信号转导、光合作用等多种生理过程。

二、脂质的分类:

 

二、实验流程:

三、脂质提取方法:

  1. 将细胞用600 μL甲醇-水=1:1(V/V)转移至10 mL 玻璃小瓶中,加20 μL内标(Lyso PC 17:0, 浓度为0.1 mg/mL 甲醇配置),加入600 μL氯仿,超声破碎;

  2. 细胞超声破碎后的溶液在冰水浴中提取10 min;

  3. 将所有液体转移到LC-MS 进样小瓶中,4°C静置30 min;

  4. 液体分层,取下层液体(氯仿层) 600 μL,(若未能明显分层,则需要离心使其分层)转移到另一高回收率GC-MS进样小瓶中;真空挥干;

  5. 在取完下层溶液的离心管中继续加入600 μL氯仿-甲醇=2:1(V/V),漩涡震荡30 s;冰水浴中超声提取10 min;

  6. 4°C静置30 min后,取下层液体,继续放入原来的GC-MS小瓶中挥干;

  7. 挥干后,GC-MS小瓶中的脂质残渣用300 μL异丙醇-甲醇=1:1(V/V)复溶(涡旋30 s,超声3 min),将溶液转移至1.5 mL的离心管中,12000 rpm,4度,离心15 min 后,取200 μL 上清液装入带内衬管的LC-MS进样小瓶中,用于LC-MS分析;


四、仪器设备:


五、脂质组学分析系统:

  1. 代谢物定性检索软件:Progenesis QI v2.3 软件(Nonlinear Dynamics, Newcastle, UK)

  2. 多元统计分析:SIMCA-P 14.1(Umetrics, Umea, Sweden)

  3. 作图软件:R语言

六、脂质组学结果展示:

1、PCA分析图

 

2、热图


3、相关性图

4、代谢通路图:

5、火山图:


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