细胞功能实验服务

细胞-功能实验服务

一、基因过表达

     目的基因过表达是研究基因功能常用的手段之一。基因过表达稳定细胞系已经广泛应用于生物学研究，包括基因调控、蛋白质工程、重组抗体制备、药物研发等。将目的基因通过转染或病毒包装的方法，能够实现目的基因过表达的稳定细胞系。

载体构建- 将目的基因克隆入高效表达载体中。

服务流程：

二、基因沉默

      RNA干扰(RNA interference, RNAi) 现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将含有靶基因的转录产物mRNA 存在同源互补序列的双链RNA(double strand RNA, dsRNA) 导入细胞后，能特异性地降解该mRNA ，从而产生相应的功能表型缺失。RNAi提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。目前常用的RNA干扰手段是： microRNA（miRNA）、siRNA （small interfering RNA）和shRNA。 

      siRNA制备的方法一般有:化学合成siRNA，哺乳动物细胞载体shRNA克隆和慢病毒载体shRNA克隆。 

      哺乳动物细胞构建shRNA质粒直接转染或通过病毒包装后转染细胞，并对转染细胞进行阳性鉴定和转代细胞株的培养，最终实现对特定基因特异性敲低的作用。

      目前RNAi技术已经广泛应用于功能基因组学、基因治疗、药物靶筛选、细胞信号传导通路分析、蛋白质相互作用等领域。

服务优势：

1. 慢病毒载体类型：非常齐全的病毒包装载体 

2. 安全性：非常安全的第三代/第四代慢病毒包装体系 

3. 超高滴度：精心优化的启动子和慢病毒包装细胞，实现超高滴度的病毒包装 

4. 载体容量：独特的载体设计，非常大可高效包装4kb 

服务流程：

         中生柏奥致力于提供先进和方便的RNAi相关工具，推出一系列用于目标基因沉默的shRNA/miRNA表达载体和抑制shRNA/miRNA的Sponge载体，同时提供RNA干扰慢病毒包装、基因沉默细胞系构建等服务。中生柏奥具有专业的技术团队和丰富的RNA干扰经验，我们提供包括shRNA/miRNA设计、慢病毒包装、阳性克隆鉴定、单克隆细胞培养、构建基因沉默细胞系在内的一站式解决方案。

服务完成后，我们将交付给您指定基因沉默的单克隆细胞株及详细的鉴定报告。

三、细胞增殖：

      细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖，通过分裂，可以将复制的遗传物质，平均地分配到两个子细胞中去，是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老和死亡的细胞；同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。

细胞增殖检测的非常准确方法之一，就是直接测定DNA的合成，同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法。通过检测细胞增殖活性，可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性，在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。

客户需提供：

1. 初步实验方案

2. 目的细胞或目的细胞信息

3. 实验分组及方案确认

中生柏奥将完成：

1. 细胞预实验：确保实验可以按照设计方案进行

2. 实验检测：根据预实验数据和客户要求进行正式实验

3. 实验报告：提供原始数据和数据分析结果

四、细胞凋亡：

      细胞凋亡（Apoptosis）是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。作为细胞的一种基本生物学现象，细胞凋亡是机体为更好地适应生存环境，而主动争取的一种死亡过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，一般过程包括4个阶段，即：诱导启动、细胞内调控、实施和凋亡细胞的吞噬搬运。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型，而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。

五、细胞迁移与侵袭

       肿瘤细胞迁移（migration）与侵袭（invasion）检测均为能够间接反映肿瘤迁移或侵袭能力，或特定情况下的迁移或侵袭能力的实验。通过研究肿瘤细胞的迁移与侵袭能力，能够为探究肿瘤发生及转移的机制提供重要的实验支撑。我司具有多年细胞检测经验，可以为客户提供多种高端优质服务，并能够根据客户的具体需求进行实验设计与规划，为客户提供完美的解决方案。

六、双荧光素酶报告基因系统

      双荧光素酶报告基因实验系统采用荧火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成双荧光素酶报告基因实验系统。实验中，报告基因（荧火虫荧光素酶）活力的改变，与基因表达的特定实验条件相关；而示踪基因（海肾荧光素酶）作为内对照，使测试不被实验条件变化所干扰，减少内在的变化因素所削弱的实验准确性，如，培养细胞的数目和活力的差别，细胞转染和裂解的效率等。荧火虫荧光素酶和海肾荧光素酶测试的组合，提供了双遗传报告基因应用的理想测试系统。

应用领域：

1. 潜在启动子/启动子核心区域检测

2. 潜在增强子/抑制子等调控子核心元件检测

3. 启动子区可能的转录因子结合位点检测

4. 启动子/增强子与转录因子的相互作用

5. 病毒/细胞相互作用

6. 药物等化学诱导因素对启动子活性的调节（抑制或增强）

7. 射线等物理诱导因素对启动子活性的调节（抑制或增强）

服务流程：

客户提供：

1. 基因模板，需提供详细的转录因子、目的基因或microRNA信息；

2. 实验细胞，如无特殊要求，金开瑞默认为使用293T细胞，则无需提供。

最终交付：

      实验流程及完整报告一份，包括实验原始数据、图片、分析结果等。

服务列表：

联系方式： 010-60606805  18610438010