DNA甲基化检测

DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。

一、 DNA甲基化简介

在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5'-CG-3'序列。DNA甲基化导致某些区域DNA构象发生变化,从而影响了蛋白质与DNA的相互作用,且达到一定程度时将导致基因失活。

 

二、 甲基化检测流程

 

 

三、 服务要求

1、提供的样品

提供细胞(≥106 个)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,基因组DNA(体积≥20μl,浓度≥50 ng/μl)。

2、提供详细的样本信息:

BSP方法待测序列≤300bp,焦磷酸测序待测序列≤60bp,且上下游保留200bp用于引物设计;MSP方法要求提供待测序列的CG侯选位点。

 

四、订购信息

服务名称 服务内容 周期 报价
DNA提取 新鲜组织、血液、细胞 1周 询价
引物设计 设计、合成 1-2周
MSP法 甲基化修饰、PCR扩增、电泳检测 1-2周
BSP克隆测序法 甲基化修饰、PCR扩增、克隆、测序 3-4周
焦磷酸测序 甲基化修饰、PCR扩增、测序 1-2周

 

五、报告内容

实验方法,步骤,所用试剂,仪器,引物序列、电泳图片、测序峰图、阳性克隆质粒;保留剩余引物和模板。

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